DF-PGT, nun möglich, durch massive Sequenzierung Techniken

Ein Forscherteam von der Universitat Autònoma de Barcelona (UAB), in Zusammenarbeit mit der Blut-und gewebebank von Katalonien, umgesetzt hat, die eine massive Sequenzierung Plattform für Präimplantationsdiagnostik Test (PGT) zum ersten mal in der Geschichte.

Die Arbeit passt sich den TruSight (TSO) – Plattform, die komplette genetische panels, Double Faktor, der Präimplantations-Genetische Tests (DF-PGT). Die Studie, veröffentlicht in PLoS ONE, geleitet von Joaquima Navarro Jordi Benet, Forscher von der UAB-Abteilung der Zellbiologie, der Physiologie und der Immunologie, inklusive der Zusammenarbeit mit dem team unter der Leitung von Francisco Vidal von der Blut-und gewebebank von Katalonien.

„Das wir erfolgreich umsetzen konnte ein innovativer, viel versprechender und Universelle Strategie, vorbereitet für eine gleichzeitige Diagnose von genetischen Mutationen und chromosomale Veränderungen innerhalb Embryonen, die durch in-vitro-fertilisation (IVF), der nutzen für die DF-PGT Kandidat Familien mit Mutationen verursacht Krankheiten enthalten in der TSO-Plattform. Darüber hinaus erfordert es nur ein einziges Labor zu Experimentieren, ohne die Notwendigkeit der Vorbereitung der Diagnose-Methodik. Dies erheblich beschleunigt den Lernprozess und die Verfügbarkeit der Ergebnisse der Familien-single-gen-Erkrankungen. Bis jetzt, es war eine Vorbereitung der besonderen Verfahren vor der Durchführung der Diagnose für jede der Mutationen,“ Joaquima Navarro sagt.

Das neue Werkzeug macht es möglich, zu diagnostizieren Mutationen sowohl direkt als auch indirekt, das erhöht den Grad der diagnostischen Genauigkeit. Zur gleichen Zeit, erlaubt es für chromosomale Charakterisierung innerhalb Embryonen für die Gesamtheit aller 23 menschlichen Chromosomenpaare, und erkennt, ob sich der embryo ist aneuploid, dass eine abnorme Anzahl von Chromosomen, oder euploid, mit der richtigen Anzahl und damit zukunftsfähiges und mit größeren Chancen der implantation.

Das team unter der Leitung von Professor Navarro entwickelte sich die DF-PGT-Strategie im Jahr 2009. Eine zukunftsweisende Technik erfolgreich angewendet, bei vielen Gelegenheiten, da dann, es besteht aus der Analyse innerhalb eines IVF-Zyklus die spezifische genetische Mutationen verursacht Erbkrankheiten, sowie eine komplette embryonalen chromosomalen Stiftung (Zytogenetik) durch eine vergleichende genomische Hybridisierung-Technik. Dies ermöglicht die Identifizierung und Auswahl der Embryonen frei von Krankheiten und chromosomenstörungen, würde behindern Ihre Entwicklung.

Im Jahr 2009, 2013 und 2015, diese Gruppe war die erste überhaupt, die die anderen DF-PGT Strategie zu wählen gesunden Embryonen und den Familien helfen, begreifen, gesunden Nachwuchs, darunter Zwillinge, frei von Hippel-Lindau-Syndrom, Zwillinge frei von Lynch-Syndrom, und zwei andere, gesunde Kinder aus zwei Familien in Gefahr von Sichelzellanämie und zystische Fibrose, beziehungsweise. Bei diesen Gelegenheiten, die Wissenschaftler mussten zunächst bereiten Sie die Diagnose-Methoden der Mutationen, die verantwortlich für den spezifischen genetischen Krankheit, in der Erwägung, dass in der aktuellen vorgeschlagene Strategie keine spezifische Vorbereitung notwendig ist.

Die überwindung von DNA-Einschränkungen in der Embryonalen Zellen

Next-generation-sequencing – (NGS) – Techniken stellen einen riesigen Sprung nach vorn in der Qualität der genetischen Analyse-Verfahren erlaubt die Untersuchung von Millionen von DNA-Sequenzen, die Massiv und gleichzeitig in einem experiment. Diese mächtigen Werkzeuge sind für die Charakterisierung von Blut-und Gewebeproben, in denen die Menge der DNA ist kein begrenzender Faktor.

„Die vorgeschlagene Methode überwindet die Beschränkungen der bestehenden, bis jetzt. Es wurde entwickelt, um die für die Proben nur sechs bis acht Blastozysten trophoderm Zellen mit der Planung eines frozen-embryo-transfer-Zyklus, in dem Fall von den Ergebnissen, der angibt, eine Abwesenheit von der Familie, Krankheiten und embryo“, erklärt Joaquima Navarro.

Vor der Umsetzung der neuen Plattform, gab es eine Notwendigkeit zu bestimmen, welche der vier am häufigsten verwendeten DNA-Amplifikation-systems war am besten geeignet für die adäquate Identifikation von Mutationen. Die Forscher waren somit auch die ersten, die jemals für die Durchführung einer chromosomalen Charakterisierung mit dem Nexus computational biology Programm mithilfe der TSO-Datenbank.

„Das tool ist auch von Interesse, in der PGMs mit dem Risiko von chromosomalen Veränderungen aufgrund der fortgeschrittenen Alter der Mutter, änderungen gefunden, der in die väterlichen Chromosomen, sowie in Fällen von wiederholten Fehlgeburten. Auch in den Fällen der Eizellen von Jungen Spenderinnen, da ein gewisses Risiko von Aneuploidie wurde auch beschrieben,“ die UAB-Forscher sagt.